QPCR-sondi meetod

Mar 01, 2022 Jäta sõnum

Koroonaviirus on teatud tüüpi viirus, millel on ümbris ja lineaarne üheahelaline positiivne RNA genoom. Selle läbimõõt on umbes 80-120 nm. Praegu nakatab see ainult selgroogseid, nagu inimene, hiir, siga, kass, koer ja kodulinnud. Uus koroonaviirus COVID{1}} on tuvastatud kui uus variant, mis võib põhjustada viiruslikku kopsupõletikku, kerget palavikku, kuiva köha, raskeid hingamisraskusi ja isegi šokki.

RXC välja töötatud uue koroonaviiruse (COVID-19) nukleiinhapete tuvastamise komplekt (QPCR-sondi meetod) töötas välja topeltsihtmärgi disaini, mis põhineb uue koroonaviiruse ORF 1ab (RDRP geen) ja spetsiifilisel konserveeritud järjestusel, mis kodeerib viiruse N geeni. nukleokapsiidi valk. Kasutades üheastmelist pöördtranskriptsiooni polümeraasi ahelreaktsiooni (RT-PCR) kombineerituna TaqMani hüdrolüüsisondi tehnoloogiaga, tuvastati proovi RNA fluorestsentssignaali muutusega fluorestsentsi kvantitatiivsel PCR-instrumendil.

PCR tuvastamise süsteem sisaldab sisemiste standardgeenide praimereid ja sonde. Proovi kogumise ja ekstraheerimise protsessi jälgitakse, tuvastades, kas sisestandard on normaalne, et vältida valenegatiivseid tulemusi.

Rui Xuni bioloogia välja töötatud uue koroonaviiruse (COVID-19) nukleiinhapete tuvastamise komplekt (digitaalne PCR-meetod) on uue koroonaviiruse kvalitatiivseks tuvastamiseks kasutanud digitaalset tilk-PCR-tehnoloogiat koos Taqmani fluorestsentssondi tehnoloogiaga.

Proovid määrati juhuslikult kümnetele tuhandetele digitaalse PCR-kiibiga toodetud õlitilkadele. Tilk reageeris PCR-ga. Pärast PCR-reaktsiooni lõppemist loeti ette iga tilga fluorestsentssignaalid ning statistika ja analüüsi tegemiseks kasutati Poissoni jaotuse põhimõtet, et saavutada uue koroonaviiruse (COVID-19) spetsiifiliste geenikoopiate täpne tuvastamine.

Nende hulgas märgiti covid-19 ORF 1ab tuvastussond FAM fluorestsentsiga, N geeni tuvastamise sond hex fluorestsentsiga ja sisestandard märgistati Cy5 fluorestsentsiga.


Küsi pakkumist

Kodu

Telefoni

E-posti

Küsitlus