Kemiluminestsentsimmunoanalüüs, CLIA on väga tundlik immuunanalüüsi meetod.
1. Põhimõte
Kemiluminestsents-immunoanalüüs ühendab immuunvastuse spetsiifilisuse ja kemoluminestsentsi kõrge tundlikkuse. Selle põhiprintsiip on kombineerida spetsiifiline immuunvastus antigeeni ja antikeha vahel kemoluminestsentsreaktsiooniga. Täpsemalt, testitavas proovis sisalduv antigeen ühineb spetsiifilise antikehaga, moodustades immuunkompleksi. Seejärel tekitab immuunkompleks rea keemiliste reaktsioonide kaudu kemoluminestsentssignaali. Luminestsentsi intensiivsus on võrdeline testitava antigeeni kontsentratsiooniga ja testitava antigeeni sisaldust saab kvantitatiivselt analüüsida luminestsentsi intensiivsuse tuvastamise teel.
2. Põhikomponendid
Antikehad: sealhulgas püüdmis- ja tuvastamisantikehad. Püüdmisantikeha fikseeritakse tavaliselt tahke faasi kandjale, et püüda testitav antigeen. Tuvastusantikeha kombineeritakse kemoluminestsentsmarkeriga, et tuvastada immuunkompleksis olev antigeen.
Tahkefaasi kandja: näiteks mikroplaadid, magnethelmed jne, mida kasutatakse püüdmisantikeha fikseerimiseks, et hõlbustada immuunreaktsiooni ning eraldamist ja pesemist.
Kemiluminestsentsmarker: tavaliselt aine, mis võib keemilises reaktsioonis tekitada luminestsentssignaali, näiteks luminool, akridiiniumester jne. Marker kombineeritakse tuvastamisantikehaga, et tekitada pärast immuunreaktsiooni kemoluminestsentssignaal.
Tuvastussüsteem: sealhulgas seadmed, nagu luminestsentsdetektorid, mida kasutatakse kemoluminestsentssignaalide intensiivsuse tuvastamiseks ja nende loetavateks väärtusteks teisendamiseks.
3. Omadused
Kõrge tundlikkus: see suudab tuvastada uuritava aine ülimadalaid kontsentratsioone, mis on tavaliselt mitu suurusjärku tundlikumad kui traditsioonilised immuunanalüüsi meetodid.
Lai lineaarne vahemik: uuritava aine sisaldust saab täpselt mõõta laias kontsentratsioonivahemikus ilma mitmekordsete lahjendusteta.
Tugev spetsiifilisus: antigeeni ja antikeha spetsiifilise seondumise põhjal on see spetsiifiliste uuritavate ainete suhtes väga selektiivne.
Kiire: tuvastamisprotsess on suhteliselt kiire ja tulemusi saab üldjuhul saada lühema ajaga.
Kõrge automatiseerituse tase: see sobib suuremahuliste proovide tuvastamiseks ja seda saab kasutada koos automatiseeritud instrumentidega, et parandada tuvastamise tõhusust.
4. Kasutusalad
Kliiniline diagnoos: seda kasutatakse erinevate biomarkerite, näiteks kasvajamarkerite, hormoonide, nakkushaiguste markerite jms tuvastamiseks, et luua oluline alus haiguste diagnoosimiseks, ravi jälgimiseks ja prognooside hindamiseks.
Ravimite väljatöötamine: seda kasutatakse ravimite kontsentratsiooni jälgimiseks, efektiivsuse hindamiseks ja ravimite metabolismi uurimiseks.
Toiduohutuse testimine: Kahjulike ainete, pestitsiidide jääkide, veterinaarravimite jääkide jms tuvastamine toidus.
Keskkonnaseire: Saasteainete ja mürgiste ainete tuvastamine keskkonnas.